亚硫酸钠在培养基的作用,硫乙醇酸钠在培养基中的作用

硫乙醇酸钠在培养基中的作用

1.基础培养基：

肉汤。含牛肉浸液和蛋白胨。广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

2.营养培养基：

基础培养基中加入特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。如血琼脂平板、巧克力血平板。

3.鉴别培养基：

观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物通过指示剂显示来鉴别细菌。 如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂(KIA)、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素(MIU)培养基等。

4.选择培养基：

加入抑制剂抑制标本中杂菌生长， 有助于所选择的细菌种类生长（SS琼脂）。

5.特殊培养基：

厌氧培养基和细菌L型培养基(疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基、高渗培养基)等。

硫乙醇液体培养基

硫乙醇酸盐流体培养基的培养温度是30-35℃。液体硫乙醇酸盐培养基(FT)成分胰酶消化酪蛋白胨　15.0gL－胱氨酸　 0.5g无水葡萄糖　5.0g酵母膏　5.0g氯化钠　2.5g硫乙醇酸钠　0.5g新配置的0.1%刃天青(Resazurin)　1.0ml琼脂　0.75g蒸馏水　1000mL制法除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解 ，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH，使灭菌后在25°C的pH值为7.1 土0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的 1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不 释 过 2 0 分钟），迅速冷却，只限加热 一次，并防止被污染。除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30〜 35°C培养。

硫乙醇酸盐液体培养基的作用

bap是一种改良培养基。

(一) 成分

胰蛋白胨　　　　　　　　 10.0g

蛋白胨　　　　　　　　　 10.0g

葡萄糖　　　　　　　　　 1.0g

酵母浸膏　　　　　　　　 2.0g

氯化钠　　　　　　　　　 5.0g

焦亚硫酸钠　　　　　　　 0.1g

琼脂　　　　　　　　　　 15.0g

蒸馏水　　　　　　　　　 1000mL

硫乙醇酸钠　　　　　　　 1.5g

万古霉素　　　　　　　　 10mg

多粘菌素B　　　　　　　　　 2500IU

两性霉素B(Amphotericin B) 2mg

头孢霉素(Cephalosporin，亦可用ceporan) 15mg

脱纤维羊血　　　　　　　　　 50mL

(二) 制法

①除抗生素和羊血外，将其他成分混合，加热溶解，校正pH到(7.0±0.2)，装瓶， 每瓶100mL，121℃高压灭菌15min，备用。此为布氏琼脂基础培养基。

②临用前加热溶解基础琼脂，冷至60℃，每100mL基础琼脂中，加入脱纤维羊血 5mL、抗生素混合液0.5mL及两性霉素B、头孢霉素混合液0.5mL，摇匀，倾注平板。

硫乙醇酸盐流体培养基主要用于

酚红变色原理:

1、酚酞变色范围PH值8.2-10.0无色变为红色酚酞是一种弱有机酸，在pH＜8.2的溶液里为无色的内酯式结构，当pH＞8.2时为红色的醌式结构。 

2、酚酞的醌式或醌式酸盐，在碱性介质中很不稳定，它会慢慢地转化成无色羧酸盐式;遇到较浓的碱液，会立即转变成无色的羧酸盐式。

3、所以，酚酞试剂滴入浓碱液时，酚酞开始变红，很快红色退去变成无色。酚酞为白色或微带黄色的细小晶体，难溶于水而易溶于酒精。因此通常把酚酞配制成酒精溶液使用。

4、当酚酞试剂滴入水或中性、酸性的水溶液时，会出现白色浑浊物，这是由于酒精易溶于水，使试剂中难溶于水的酚酞析出的缘故。 

硫代硫酸钠培养基

克氏双糖铁培养基是固体培养基。

英文名称:Modified KIA Iron Medium

用途:用于细菌复合生化实验(葡萄糖、山梨醇)。

成分(g/L)

酵母粉 3.0

蛋白胨 15.0

牛肉粉 3.0

月示蛋白胨 5.0

氯化钠 5.0

山梨醇 20.0

葡萄糖 1.0

硫酸亚铁 0.2

硫代硫酸钠 0.3

琼脂 13.0

酚红 0.024

pH值7.4 ± 0.2 25℃

亚硫酸钠在培养基中的作用

1．发酵法 日本Shoko （1986）专利报道，用链球菌或微生物提取的酶，从结合型胆汁酸制取游离牛磺酸，将来源于牛肉的链球菌在含有1．5kg牛胆汁提取物和葡萄糖的培养基中37℃培养两天，可以产45g牛磺酸。据Nakanishi（1998）报道，将一株谷氨酸律状杆菌在含有葡萄糖、蛋白陈、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、生物素、酵母膏、尿素和 VB1的培养基中 28℃摇瓶发酵 24h，然后在含有糖浆、酵母膏、KH2PO4、MgSO4、CaCO3、VBl的培养基中28℃发酵4天，最后牛磺酸产量为870mg/k

2．二氯乙烷法 以二氯乙烷为原料，用磺化。氨化、酸化三步合成。

3．乙醇胺法 丁学杰（ 1991）用氯化、磺化两步进行。先在盐酸中滴加乙醇胺，然后加入氯化氢于一氯乙胶晶体，收率为76．5％，再在亚硫酸钠溶液中滴加氯化氢乃一氯乙胺晶体溶液，然后浓缩。用乙醇结晶，精制，收率为63％，两步制备牛磺酸的总收率为47．9％，纯度为98．8％。

4.乙撑亚胺法 用乙撑亚胺和亚硫酸直接反应，一步合成牛磺酸，反应温和，纯度为99．4％，产率达 88．9％。

硫代硫酸钠在培养基中的作用

SS平板的原理: SS为强选择性培养基.其成分除了有必要的胨、牛肉膏等氮、碳源外，其他则为选择性抑制剂和缓冲剂。如柠檬酸钠、胆盐、硫代硫酸钠的协同作用及煌绿共同来抑制肠道非病原性细菌及部分大肠杆菌的生长。

对志贺菌属及沙门菌属相对抑制性较弱。硫代硫酸钠有助于大肠菌的着色，柠檬酸铁能缓解某些药物对病原菌的毒副作用，同时与细菌产物起反应呈黑色菌落。中性红指示剂可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌鉴别开，前者为红色菌落，后者为无色菌落。

硫乙醇盐酸流体培养基

培养基的种类有：

1）基础培养基：含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

（2）营养培养基：在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。

（3）鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。

（4）选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。

（5）特殊培养基：包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，除含营养成分外，还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势，如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型，由于胞内渗透压较高，故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。