一般程序: 1、 测定物理常数(判断纯度) 2、 确定分子量与分子式 常用技术:MS。如FAB-MS、FD-MS、CI-MS、EI-MS、HR-FAB-MS 3、 鉴定组成的苷元和糖 技术方法:将苷水解成苷元和单糖,然后再逐一鉴定水解产物。 糖的种类的确定方法:1)将水解液和对照品进行PC、TLC、GC、HPLC实验,然后比较图谱;2)NMR。优点:无需水解解析苷的信号 4、 确定苷中糖的数目 常用方法:1)光密度扫描法 2)波谱(现多用):MS、NMR A、MS:用于确定苷与苷元的分子量。 B、NMR:1H-NMR和13C-NMR。二者均能确定糖的数目 5、 确定苷元与糖、糖与糖之间链接位置 1) 苷元-糖 方法:A、13C-NMR,利用苷化位移(GS)。 苷化位移:在13C-NMR中,苷元的-OH与糖成苷以后,苷元成苷的C原子(α-C原子)及其邻位C-原子(β-C原子)的信号发生化学位移,同时苷分子的糖部分端基C发生显著化学位移,这种信号即为苷化位移(GS)。 B、2D-NMR,利用相关峰确定。其中HMBC最常用。 2) 糖-糖 方法同上 3) 糖-糖的链接顺序 方法:部分水解法和波谱分析法(如MS、FAB、NMR) 6、 确定苷键构型 方法:1)酶水解法:确定α、β构型 2)NMR:1H-NMR和13C-NMR。
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